OGD模型即糖氧剥夺(OGD)离体脑缺血模型
糖氧剥夺(Oxygen and glucose depriv%ation,OGD)模型:
此法可模拟在体脑缺血模型，又称离体缺血模型。
我们具有美国公司消耗的三气培育箱，经过直接通入N2的方式准确掌握培育箱内CO2和O2浓度，同时剥夺神经元培育基中的糖，从而形成培育神经元缺氧缺糖的环境，模拟在体脑缺血的状况。
实验如下
手腕 ：议论一种烦琐、坚定、可重复的大鼠成年神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型的制备方法 。
方法 ：以来自于成年Fisher344大鼠的海马神经干细胞系为研讨对象，以无血清培育基培育并传代，并用nestin和DAPI免疫荧光双染确认其生物学特性。
将三气培育箱氧气浓度调至1％以制备缺氧环境，将培养基换为不含葡萄糖的Earle′s平衡盐溶液，区分缺氧缺糖2h、4h、6h、8h、10h后取出细胞。
恢复一般条件继续培养24 泰国白法情降有哪些h后倒置显微镜下观察细胞外形学变化，CCK-8比色法检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率。同时设置常氧常糖的一般对比组。
结果 ：与一般对比组相比,缺氧缺糖2h组细胞吸光度值清楚降低，细胞存活率有肯定的增加，但差异无统计学意义(P＞0.05)。
随着缺氧缺糖时间延伸，神经干细胞外形学损伤逐渐减轻，细胞吸光度值逐渐下降，缺氧缺糖6h后与一般对比组比拟差异有统计学意义(P＜0.05)。
缺氧缺糖6h起细胞存活率均较正常对比组清楚下降，比拟差别有统计学意义(P＜0.05)；神经干细胞凋亡率逐渐增高,且均分明高于正常比照组，差别有统计学意义(P＜0.05)，其中缺氧缺糖6h时细胞的凋亡率已逾越50％。
结论 ：运用三气培养箱物理缺氧办法 可胜利树立一种烦琐、有效的神经干细胞体外氧糖剥夺/复氧模型。
DAPI细胞染色液(DAPI Staining Solution)是适用于稀有细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也称DAPI dihydrochloride，分子式为C16H15N5 · 2HCl ，分子量为350.25。可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA区分后可以发生比DAPI自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于一般的细胞核染色以及某些特定状况下的双链DNA染色。DAPI的最大激起波长为340nm，最大发射波长为488nm，DAPI和双链DNA辨别后，最大激起波长为364nm，最大发射波长为454nm。本DAPI染色液能够直接用于活动细胞或组织的细胞核染色，亦能够依照详细泰国最厉害的情降师 实验央求，稀释到相应浓度后中止染色。一般推荐义务浓度为0.5ug～10ug/ml。
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